Pascual, G. Jefe del Servicio de Seguridad Biológica del Centro de Investigación en Sanidad Animal, INIA. Director del Centro de Referencia FAO en Gestión del Riesgo Biológico.

Introducción a la inducción electrostática

La inducción electrostática permite atomizar un producto químico biocida o desinfectante en un tamaño medio de gota de 33 micras y cargarlas eléctricamente gracias al paso del aerosol generado a través de una boquilla que presenta un electrodo activado, siendo muy útil en la descontaminación de superficies.

El aerosol, generado y cargado, induce a una reordenación eléctrica de la superficie de un material, pasándolo de un estado de equilibrio eléctrico (neutro) a cargado, permitiendo una atracción entre ambos de 70 a 80 veces la fuerza de la gravedad y asegurando gracias a la reordenación eléctrica, la ausencia de superposición.

El uso de este principio físico en la aplicación de desinfectantes de superficie sobre espacios biocontaminados o, que presentan una carga microbiológica no desada, supone un salto cualitativo en la eficacia del proceso.

Se impide, en comparación con los métodos de rociado tradicionales, la generación de espacios vacíos entre gotas, que impiden una dispersión del producto de forma continua y homogénea, en una cantidad adecuada y con un tiempo de permanencia mínimo. Es decir, de esta forma se favorece la creación de quimio-film activo sobre el bio-film existente.

De entre los biocidas/descontaminantes existentes en el mercado, que presentan la mayor eficacia espectral antimicrobiana, menor tiempo de residencia frente a la mayor eficacia, VIRKON® es el más completo. La combinación de ambos, resulta a priori la posibilidad de aplicación de un método altamente eficaz en la bio descontaminación de superficies.

Objetivo de los biocidas en la descontaminación de superficies

El objetivo principal del presente estudio es demostrar la eficacia descontaminante combinada entre el uso de un sistema de inducción electrostática de última generación y el biocida de amplio espectro VIRKON®,  con el fin de concluir sobre su idoneidad de uso en procesos de bio descontaminación de superficies en Instalaciones científicas de diagnóstico, investigación y experimentación animal. Asimismo se tratará de demostrar que Geobacillus stearothermophilus, en sus diferentes presentaciones, resulta adecuado en la validación microbiológica del proceso con el biocida seleccionado.

Material y método

Ámbito de estudio: el estudio se ha llevado a cabo sobre espacios de contención biológica en los que se trabaja con muestras infecciosas y/o susceptibles de crear cualquier tipo de contaminación.

Material empleado :Geobacillus Stearothermophilus es una bacteria Gram-positiva aerobia y con forma de bacilo. El bioindicador ha sido utilizado en dos presentaciones: no encapsulado (en siembra) y autocontenido.

• Indicadores biológicos autocontenidos: MATACHANA 85022 1.0X106. ATCC 7953. Lote: 4052 1812
• Contienen una tira de papel impregnado con esporas (G. Stearothermophilus) y el medio de cultivo con indicador de pH separado en una cápsula todo dentro de un vial flexible de propileno. Se han utilizado de dos modos:
  • Apertura la cápsula y extracción del medio de cultivo interior antes de proceder a la descontaminación, dejando el tapón abierto,
  • Apertura la cápsula y mantenimiento del medio de cultivo interior (sin extracción) antes de proceder a la descontaminación.
• Indicadores no encapsulados: SPORDEX NA300P Geobacillus Stearothermophilus 12980 2.1X105 envueltos en Tyvek/clear (cara porosa) Mylar. los discos inoculados con la espora son de poliestireno Lote: AH-006.Caducidad:2019-05-31.
• Indicadores no encapsulados: SPORDEX NA333 Geobacillus Stearothermophilus 2.2X106 envueltos en Tyvek/Tyvek. Los discos inoculados con la espora son de fibra de vidrio.
• Bioindicador SPORDEX NA300P 2.1X105 (Geobacillus stearothermophilus STCC7953). Lote:K18002 1388 Caducidad:2019-04-18
• Medio de cultivo Spordex® NA117. Lote: PM199 Caducidad: 2018-12-06
• Placas de contacto RODAC: Agar Mac Conkey Medio de diferenciación selectivo para el aislamiento de enterobacterias así como otros bacilos Gram-negativos y entéricos, de fácil desarrollo, aerobios y anaerobios facultativos, fermentadores o no de la lactosa. Posee en su composición cristal violeta y sales que inhiben el crecimiento de bacilos Gram-positivo. Las bacterias entéricas fermentan la lactosa y pueden ser detectadas utilizando el indicador de pH rojo neutro originando colonias de rosadas a rojas, mientras que los no fermentadores aparecen como colonias trasparentes Es un medio de cultivo de color rojizo púrpura con un pH final 7,1 ± 0,2 y se debe incubar durante de 24 a 48 horas a 35-37oC.
• Placas de contacto RODAC: Agar Sabouraud Cloranfenicol. Medio selectivo para hongos (levaduras, mohos y dermatofitos). El medio inhibe el crecimiento bacteriano gracias al uso del cloranfenicol (antibiótico) y favorece el crecimiento de los hongos debido a la presencia de azucares y peptonas en su composición. Es utilizado para el cultivo de hongos, sobre todo dermatofitos. De color pardo, presenta un pH final: 5.6 ± 0.2. Se deben incubar durante 48 horas a 30 – 35 °C si se buscan levaduras y a 25ºC – 30°C si se buscan hongos filamentosos. En el caso de buscar dermatofitos el periodo de incubación se amplía hasta las dos semanas.
• Placas de contacto RODAC: Agar VRG. Medio de cultivo para enterobacterias, bacterias coliformes fermentadoras de lactosa, cepas de E. coli no fermentadoras de lactosa, y diferente no fermentadoras de lactosa. Contiene glucosa para la fermentación, rojo neutro como indicador y cristal violeta y sales biliares que inhiben el crecimiento de bacilos Gram-positivos y permiten el crecimiento de organismos Gram-negativo.
• Placas de cultivo (ref. 25011). Corning® 60mm. 60×15 mm
• Incubador MATACHANA®. Art. Nº 85208
• VIRKON®. Amplio espectro microbiológico, produciendo disrupción de la pared celular y degradación e inactivación de los ácidos nucleicos. Se trata de una mezcla equilibrada y estabilizada de compuestos peroxidados, tenso-activos y ácidos orgánicos. Formulado con presentación sólida en polvo proporcionado por la empresa FHP (Francisco Hurtado Portela, España).
• Equipo de pulverización de inducción electrostática; CS-900 de Bioplanet International LLC® nº serie: 120G00956 de la casa MicroClean para bio descontaminación de superficies
• Pulverizador ES Sprayer. ES-120 de Bioplanet International LLC®. P/N: 200026. S/N: 115CS0114 de la casa MicroClean (foto 1).

Foto 1: Equipo Bioplanet CS-900. MicroClean

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